Ploskireva medium (Bacto-agar F): beskrivelse. medisinsk mikrobiologi

Ploskireva medium (heretter referert til som fremdeles Bacto agar F) er et næringsmedium for dyrking av visse mikroorganismer, først og fremst Shigella og Salmonella. Som en kilde for hennes bruk infiserte materialer: urin, galle, avføring.

historien

Nikolay Ivanovich Ploskirev - Sovjetmikrobiolog og Hedret lege. Han ble født i 1869 og døde i 1948, etter å ha jobbet mesteparten av sitt liv i hjembyen - Tomsk.

I 1888, han, fremtiden vitenskapsmann, uten å fullføre den sjette klasse på skolen, sluttet seg til hæren. han var i stand til å fullføre opplæringen bare i 1892, da bestått eksamen for opptak til Imperial Tomsk University, studerte han ved Det medisinske fakultet. I 1898 fikk han tittelen lege.

Ploskirev deltok i russisk-japanske krig, og etter det jobbet i Tomsk sykehuset. I 1910 ble han utnevnt til stillingen som leder av Tomsk dermatologiske og kjønns sykehus, og i tretti år har vært sin faste hodet. Den samme forskeren var en av grunnleggerne av STI klinikken i Tomsk.

Nikolay Ivanovich Ploskirev skrev en serie verk viet til kampen mot kjønnssykdommer.

struktur

Onsdag Ploskireva - materiale for dyrking av tarmbakterier, og derfor må inneholde flere typer næringsstoffer. Det fremstilles i tørr form.

Ganske en stor andel av den totale vekten er pankreatisk hydrolysat brisling (10,4 g / l). Litt mindre utgjorde hydrocitrate dibasisk natrium (8,5 g / l). Det er også et tørt næringsmedium og melkesukker (8,62 og 7,3 g / l).

Den andre tittelen Ploskireva medium - J. Bacto-agar i blandingen det er til stede i en mengde på agar, 6,94 g / l. Seriovatistokislogo vannfritt natriuminnhold på 5,1 g / l. Det er tilstedeværelsen av vannfritt dinatriumfosfat - 2,1 g / l, natriumsalter av cholsyre omtrent 3,46 g / l og sodaaske - 2,4 g

Mindre enn et gram inneholdt deri indikatorer - nøytral rød (0,05) og brilliant grønn (0,0002). Jod innhold - 0,13.

søknad

Studiet av de biokjemiske prosesser i bakterier spiller en meget viktig rolle i diagnostisering av sykdommer som forårsaker anaerobe organismer. Arter i denne familien - hundrevis. De er nesten identiske i morfologi og kulturelle egenskaper, og mest pålitelige måten å skille dem fra hverandre - er studiet av biokjemi.

Undersøkelsen begynner med inokulering av patologisk materiale i kulturmediet. Hun patologisk differensial for koliforme bakterier og en del av det, i tillegg til vanlig agar, omfatter lett og laktose. Behandling evne laktose - et viktig tegn på differensiering av enterobakterier. Hvis dette blir oppdaget, forskyver pH-verdien mot surhet og indikatoren blir aktivert, som slår kolonien.

Andre land kan bruke andre næringsstoffer media, men deres virkningsmekanisme tilsvarer de tre mest vanlig i Russland - dette miljøet Endo og Levine Ploskireva onsdag.

Beskrivelse av metoden

Utenlands Ploskireva analog medium er en såkalt MacConkey-agar. I ferdig form gjennomsiktig oppløsning har en lys rosa-gul farge. Kolonier i stand til å behandle laktose, blant Ploskireva gi rød (tranebær) farge. Dersom bakteriene ikke kan behandle den, eller koloni er fargeløst eller har en svak farge.

Gitt at sammensetningen av mediet omfatter stoffer Ploskireva inhibitorer (brilliant grønn, gallesalter, jod), er det nesten fullstendig hemmer veksten av gram-positive flora, som i den første dagen eshehiry signifikant retarderer veksten, samt andre vanlige ledsagende mikroflora.

andre ben

Videre av interesse er valget av kolonien, og det er podet på en primær lagringsmedium og differensiering. Miljø i hvilket det er utsåing skal inneholde flere substrater. Bakteriekultur skal oppdage enzymatisk aktivitet med hensyn til dem, til den samme medium plassert i rørene, slik at det er to områder:

• en hvor den hellende agar;
• med en kolonne.

Interessen av forskere i kolonien befolkede skrådel tett slag og i en kolonne - en stikk. På dette stadium, det medium som benyttes Russell, Kligler eller Olkenitskogo. Som differensialdiagnose anvendt og Ploskireva onsdag.

Mikrobiologi og patogene organismer

Agar Ploskireva er en viktig faktor for å påvise infeksjoner forårsaket av Enterobacteriaceae. Så, for eksempel, er det vokst og differensiert kolonier av mikroorganismer som forårsaker smitteførende dysenteri. Denne anaerobe organismer som hører til slekten Schigella.

Som alle som er en del av en familie av tarmbakterier, shigella ha form av stenger, på størrelse med to mikrometer. De utgjør ikke kapsler og sporer har flageller - det gir dem mulighet til å skilles fra Salmonella, som i sin tur er mobile. De vokser bra på de fleste enkle media, ved en temperatur noe over omgivelsestemperaturen (35-37 ° C) og 7,4 pH. Av naturen av vekst, trenger kolonier ikke avvike fra Salmonella.

Som diskutert ovenfor, kan mikroorganismene være i det vesentlige morfologiske forskjeller, men varierer betydelig i biokjemiske prosesser i livet. Således, med unntak av Shigella Nyukestl, uten dannelse av syregass finner sted i løpet av fermentering av karbohydrater. Med unntak av Shigella sonnei, kan de ikke fermentere laktose, men blir spaltet glukose. Bare til sine viktige funksjoner, kan du bære dem hva de kan for å redusere niraty til nitritt. Deres kolonier ble spaltet med urea, så vel som i dyrkningsmediet er ikke flytendegjøring av gelatin.

Innsamling og forberedelse av frø

For å påvise midler av dysenteri, kreves mikrobiologiske prøver infiserte omgivelser, dvs. faeces pasient. Ved mottak av materialet, må du så raskt som mulig for å gjøre det såing. Hvis dette ikke er mulig, må kilden plasseres i et konserveringsmiddel - fosfatbufferblanding eller glycerol. Ved 4 ° C, kan de lagres i mer enn en dag. Samle opp materialet må utføres ved hjelp av en rektal glassrør som er satt inn i endetarmen.

For undersøkelser av et materiale valgt purulent slim stykker som skal vaskes etter to til tre tuber isoton natriumkloridoppløsning.

Påføring av patogene bakterier i miljøet Ploskireva gjort glasspatel. Man trenger å gni på en liten del av sin agar, deretter rive av spatel på miljøet, og det gjenværende materiale blir gnidd inn i sådd flate. Hvis seeding er gjort i et par kopper, deretter til hver av dem trenger å plante en ny gruppe.

Hvis muco-purulente stykker der i å ta på en dedikert analyse, betyr ikke det at det ikke er noen tilstedeværelse av patogene bakterier. I et slikt tilfelle er det nødvendig å emulgere avføring i 10 ml natriumklorid (konsentrasjon 0,85%) og deretter sår en eller to dråper på et medium Ploskireva. Non-emulgert stol kan sås i selenitovy buljong. Han brukte også, hvis, i stedet for avføring er oppkast eller vasker.

mikrobiologisk diagnose

I den første fasen av mikrobiologiske undersøkelser utført såing av sykdomsfremkallende bakterier i to kopper, så for å se hvordan å vokse Shigella. Onsdag Ploskireva produsert en avling, og den andre - på miljøet eller Endo Levin.

På grunn av det faktum at det var stammer av Shigella er resistente mot antibiotika, til mediet ble supplert med kloramfenikol. Deretter skjer det i løpet av dager inkubasjon i en inkubator ved 37 ° C.

På den andre dagen til å utforske de voksne kolonier. De som ikke er på differensialdiagnostisk medium vokst fargeløs, er det nødvendig å luke ut Russells medium eller kort "brokete rad." Videre forskning blir utført av algoritmen av de viktigste avlinger på dem. Kolonier av Shigella onsdag Ploskireva vokse i form av gjennomsiktige, fargeløse og små kolonner. De er av to typer:

• avflatet med taggete kanter;
• avrundet, konveks, med en typisk våt glans.

Tre eller fire kolonier må mikroskopirovat og undersøkt for mobilitet. Dersom sistnevnte ikke dukker opp, flyttet de på onsdag Olkenitskogo å isolere en ren kultur. I fravær av karakteristiske kolonier Shigella, eller hvis ingen vekst er observert i det hele tatt, er det nødvendig å Endo-agar eller Ploskireva produsere såing av selenitovogo kjøttkraft. Dersom de typiske kolonier er tilstede i tilstrekkelig antall, sette den beregnede agglutinasjon. En blanding av sera sonnei og Flexner, inntreffer reaksjon på glasset.

videre forskning

På den tredje dagen det er endringer som har skjedd i kolonier på mediet Russell. Hvis det er en kultur som ikke forringer laktose og glukose fermenterer for å produsere en syre, blir den separert og analysert, bruke mikroskopi, samt utføre såing i "broket rad", men denne gang utvidet. Bare sette agglutinasjon reaksjon, for å serologisk identifikasjon.

På den siste dagen, kan det konkluderes på grunnlag av endringer i "brokete nummer" (hvis det er gjæring av karbohydrater), samt oppsummerer agglutinasjon reaksjon.

Lagring og tilberedning

Fremstilling av agar Ploskireva skjer som følger:

1. 55 g tørrsubstans blir omrørt i en liter destillert vann.
2. Kokes i to til tre minutter før agar ennå ikke er helt smeltet.
3. Hell over i petriskåler (sterilitet valgfritt) lag på 5-6 mm.
4. Platene får stå åpent i en halv time ved romtemperatur (18-25 °). Etter denne tid mediet er tilstrekkelig å hardne og tørr.

Onsdag Ploskireva lysfølsomme og hygroskopisk. Pulveret bør oppbevares i en forseglet pakke, må den relative fuktighet i rommet, ikke overstige 60%. Den optimale temperatur for lagring av 2 ° C til 25 ° C. Lagring må overholde disse reglene, ellers mulige unøyaktige resultater.